Kvaliteta uzorka iz EBUS-TBNA igala i testiranje molekularne patologije

Novi zahtjevi za odabir igle za testove tkivnih jezgri, blokova stanica, NGS i PD-L1

https://profed.olympuschina.com/gs/thoracicsurgery/12628/

U eri precizne onkologije,EBUS-TBNAmora odgovoriti ne samo "Je li to rak?" ali također pružaju: histološku subtipizaciju (adenokarcinom/karcinom pločastih stanica/velikostanični/NSCLC-NOS), Ki-67, TTF-1/p40 bojenje, ekspresiju PD-L1 (klonovi 22C3/SP142, itd.) i profil mutacije pokretača (EGFR, ALK, ROS1, BRAF, MET, RET, KRAS i široke NGS ploče). To zahtijeva prinose DNK koji se obično kreću od 10-250 ng po postupku (ovisno o platformi) uz očuvanje arhitekture tkiva za IHC-sposobnosti koje premašuju one tradicionalnih FNA citoloških razmaza samih. Posljedično, dizajn EBUS igle se razvija prema "prikupu tkiva" (FNB/core yield).

Vrste uzoraka i odnosi igala:

• FNA (aspiracija tankom iglom):​ Back{0}}single-bevel 21G/22G igle + sukcija negativnog tlaka → klasteri stanica + fragmenti strome → razmazi (Diff-Quik/H&E) + blok stanica. Stanični blokovi dopuštaju IHC i neka molekularna testiranja, ali ograničeni volumen tkiva može spriječiti primjerenost DNK za cijeli-eksom ili velike NGS ploče.
• FNB (biopsija tankom iglom):​ Franseen triple{0}}edge, crown-cut, or ProCore reverse{2}}bevel igle → tkivne trake/mikro-cores → fiksni, ugrađeni dijelovi. Čuva arhitekturu tkiva, omogućujući vrhunsku IHC kvalitetu i veće prinose DNA/RNA u usporedbi s ekvivalentnim blokovima stanica FNA.
• 19G velike-lumenske igle:​ Veći unutarnji promjer aspirira male jezgre tkiva ili veće volumene uzorka, prikladne za višestruko testiranje, iako je potreban oprez zbog kontaminacije krvi koja utječe na kvalitetu uzorka.
• Integracija ROSE (brza procjena-na mjestu):​-citopatolozi/tehničari na licu mjesta preliminarno procjenjuju bris, procjenjujući "odgovarajuću celularnost", nekrozu, granulome ili limfoidno tkivo, donoseći odluke o prekidu uzorkovanja ili promjeni stanice. ROSE smanjuje prosječne prolaze igle (često 3-4 u odnosu na . 6-7 bez ROSE) i poboljšava stope primjerenosti uzorka. Neki centri koriste fazno-kontrastnu mikroskopiju za trijažu staničnih blokova.

Implikacije za odabir igle na temelju molekularnog testiranja:​ Za pacijente s NSCLC-om koji su podvrgnuti procjeni ciljane i imunoterapije, preporučljivo je davanje prioriteta 19G FNB ili 21G Franseen FNB iglama gdje su dostupne, osiguravajući uzimanje uzoraka s najmanje 2-3 stanice za stvaranje blokova stanica i jezgri tkiva. Sam citološki probir može koristiti 22G FNA igle, ali zahtijeva veći broj prolaza i pripremu bloka stanica. Studije sugeriraju da su stope uspješnosti NGS-a trend veće s uzorcima dobivenim putem 19G igle u usporedbi s 22G FNA, posebno za tumore bogate strome ili paucicelularne tumore.

Preporuke za rukovanje uzorkom (često detaljno opisane u Uputama za upotrebu - IFU):​ Odmah isperite lumen igle nakon-uboda s BSA/PBS puferom u epruvetu za prikupljanje → obradite do bloka stanica (fiksacija formalinom → umetanje parafina) ili fiksirajte jezgre tkiva izravno u formalinu. Spriječite isušivanje lumena kako biste izbjegli degeneraciju stanica. Upravljajte začepljenjem nježnim pomicanjem stileta ili primjenom kratkih mlaznica zraka-naglašavajući funkcionalnu svrhu stileta (sprječavanje začepljenja + očuvanje cjelovitosti uzorka).

Zaključno, odabir EBUS-TBNA igle prelazi s "samo penetrirajuće" na "prilagođavanje vrste igle i proceduralnog tijeka rada na temelju zahtjeva molekularne patologije". Ova evolucija predstavlja središnju točku multidisciplinarne suradnje između medicinskih onkologa, patologa i interventnih pulmologa.